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HI-Fidelity DNA Polymerase

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货号:  EP101-01

单位:  袋

品牌:  三狮

规      格: 

500U

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1.   申领对象:欢迎申领健吉跃的免费试用产品。健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,非专业人员不得申领。

2.   使用范围:健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3.  申领个数:免费试用产品仅限于试用的目的,对于任何一种免费试用产品,只能申领1个,但可以同时申领多种免费试用产品。

4.  申领次数:免费试用产品仅限于试用的目的,每个实验室对于相同的免费试用产品仅限申领一次。

5.  运费:如果单独申领免费试用产品,运费由申领人承担。如果在订购产品时申领,运费和所订购产品合并计算。

 

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3.  如发现产品有任何缺漏或破损,请在收到产品后2个工作日内通知我们。

4.  我们提供的所有产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。如有单位或个人擅自改变我们产品的用途,或存放于不适当的地方,我们不承担任何责任。

产品概述

HI-Fidelity DNA Polymerase

货号:EP101           规格:500U/1000U/5000U          保存:-20℃保存

产品简介:

HI-Fidelity DNA Polymerase是经过基因工程改造的、具有高扩增能力和高保真性的DNA聚合酶。它与传统的聚合酶(如Taq DNA聚合酶和Pfu DNA聚合酶)相比,可以更快、更准确的达到PCR扩增效果。

产品组成:

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储存条件:

-20℃条件下保存,有效期至少12个月。反复冻融15次不影响扩增效率,但仍建议在第一次融解后充分混匀,分装后于-20℃保存,以避免多次反复冻融可能造成的影响。

活性定义:

75℃活性测定条件下,在30min内摄入10 nmolesdNTPs使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1个活性单位(U)。

质量控制:

本产品经质量检测,不含脱氧核糖核酸内切酶活性、脱氧核糖核酸外切酶活性和核糖核酸酶污染;PCR方法检测无宿主DNA残留;能有效扩增植物基因组中的单拷贝基因。

产品特点

1. 具有强力的3’→5’核酸外切酶活性(校正活性),可准确地对目的片段进行扩增。

2. HI-Fidelity DNA Polymerase的保真性是Taq酶的约60倍,优化后的PCR反应缓冲液使得其扩增速度达到Taq酶的2倍,Pfu酶的6倍。

3. 可扩增结构复杂的DNA模板,如富含GC和复杂二级结构的模板。

4. 主要应用于PCR克隆(平末端克隆),长片段高保真扩增,突变修复,测序反应,复杂模板扩增等。

产品用途:

普通及高保真PCR、复杂DNA的扩增、DNA片段拼接、定点突变、全基因合成、DNA末端补平等。

操作方法:

1. PCR反应所需溶液室温平衡至完全溶解,充分混匀后于冰上进行PCR反应体系配置。

2. 按照推荐的扩增体系完成加样后,温和混匀并短暂离心后再放入PCR仪进行反应。

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注:反应体系中各组分用量可根据实际需求进行调整。

反应条件:

通常情况下,可以采用两步法进行反应;如果两步法扩增不理想,可以采用三步法设置PCR反应程序。鉴于cDNA模板中目标基因丰度的不确定性,建议初次扩增时使用35-38个循环,根据扩增结果再调整扩增循环数。

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注:反应条件可以根据实际需求进行适当调整和优化。

注意事项:

1. 根据引物选择合适的退火(延伸)温度,引物终浓度可在0.2-1.0μM范围内调整。

2. DNA模板可根据浓度进行适当调整,质粒模板(1-30ng),基因组模板(10-100ng),cDNA模板(1μL反转录产物(1μg RNA for 20μL RT Reaction)),针对复杂DNA以及高GC含量模板,可选择GC Enhancer,可显著增强的扩增效果。

3. 扩增前后要使用专用的区域和移液器,戴手套操作并经常更换,PCR反应完成后切勿直接打开反应管,可放于4℃或者-20℃充分冷却后再进行开盖操作,以最大限度的减少PCR产物可能对实验环境产生污染的风险


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