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生化试剂

2× Taq PCR Master Mix (without dye)

30

货号:  E003

单位:  袋

品牌:  三狮

规      格: 

1mL

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1.   申领对象:欢迎申领健吉跃的免费试用产品。健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,非专业人员不得申领。

2.   使用范围:健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3.  申领个数:免费试用产品仅限于试用的目的,对于任何一种免费试用产品,只能申领1个,但可以同时申领多种免费试用产品。

4.  申领次数:免费试用产品仅限于试用的目的,每个实验室对于相同的免费试用产品仅限申领一次。

5.  运费:如果单独申领免费试用产品,运费由申领人承担。如果在订购产品时申领,运费和所订购产品合并计算。

 

  • 质量保证与免责声明:

1.   我们保证向用户提供完全合格的产品。如您认为产品确实存在质量问题,请在收到产品7个工作日内并且产品使用量没有超过一半前以书面方式发送电子邮件至jjy@jianjiyue.cn,否则将不予受理或赔偿。同时产品赔偿只限于产品价值本身,不涉及其他任何损失。如果您的样品非常珍贵,请务必先使用适当的阳性对照进行检测,在检测体系建立起来以后,再检测您珍贵的样品。

2.  若因用户贮存或使用不当所引起的质量投诉,我们不予承担责任。除质量原因外的其它任何问题,例如缺乏使用某种试剂盒所需的仪器,订购错了试剂盒等,我们不承担任何责任,也不接受非质量原因引起的客户投诉。

3.  如发现产品有任何缺漏或破损,请在收到产品后2个工作日内通知我们。

4.  我们提供的所有产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。如有单位或个人擅自改变我们产品的用途,或存放于不适当的地方,我们不承担任何责任。

产品概述

2× Taq PCR Master Mixwithout dye

货号:E003                 规格:1mL                  保存:-20℃保存

产品简介:

2× Taq PCR Master MixDNA PolymerasePCR BufferdNTP Mix等的2倍浓度的预混溶液。使用本产品时,只需向预混溶液中加入模板和引物,以ddH2O补足体积便可进行PCR反应,简化了操作步骤,降低了PCR操作过程中的污染风险。本产品灵敏度高,特异性强,线性范围广,对目的基因定量更准确。使用本产品扩增得到的PCR产物3’端带A碱基,可克隆至T载体。

产品组成:

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储存条件:

-20℃条件下保存,有效期至少12个月。

质量控制:

本产品经质量检测,不含脱氧核糖核酸内切酶活性、脱氧核糖核酸外切酶活性和核糖核酸酶污染。宿主基因组残留低于10拷贝。

产品用途:

PCR法扩增DNADNA序列测定。

使用方法:

1.PCR反应所需的各种溶液室温平衡至完全溶解,充分混匀后于冰上进行PCR反应体系的配置。

2.建议PCR反应体系的配置在冰浴或冰盒上进行,可参考推荐反应体系进行设置。

3.配置好的反应体系用移液器充分吹吸混匀,盖好PCR管盖,做好标记,室温离心数秒。

4.将准备好的PCR管放入PCR仪进行上机,设置反应条件,开始PCR反应。

 

 

 

推荐反应体系:

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反应条件:

通常情况下,可以采用两步法进行反应;如果两步法扩增不理想,可以采用三步法设置PCR反应程序。鉴于cDNA模板中目标基因丰度的不确定性,建议初次扩增时使用35-38个循环,根据扩增结果再调整扩增循环数。

image.png

注:反应条件可以根据实际需求进行适当调整和优化。

注意事项:

1.      延伸时间可根据PCR产物的长度、GC含量等实际情况进行调整,每kb产物的延伸时间与模板复杂程度密切相关,简单模板为20s,一般模板为30s,复杂模板为1min

2.     PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件,通常使用的引物终浓度可在0.2-1.0μM范围内调整,DNA模板可根据浓度进行调整,模板复杂或GC含量建议延长预变性/变性或延伸时间,提高变性/退火温度等。

3.      扩增前后要使用专用的区域和移液器,戴手套操作并经常更换,PCR反应完成后切勿直接打开反应管,可放于4℃或者-20℃充分冷却后再进行开盖操作,以最大限度的减少PCR产物可能对实验环境产生污染的风险。

4.      由于本产品不含染料,反应完成后需加DNA上样缓冲液再进行电泳。