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• 免费试用产品申领规范：

1.   申领对象：欢迎申领健吉跃的免费试用产品。健吉跃所有产品，包括免费试用产品，仅限于专业人员的科学研究用，非专业人员不得申领。

2.   使用范围：健吉跃所有产品，包括免费试用产品，仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3.  申领个数：免费试用产品仅限于试用的目的，对于任何一种免费试用产品，只能申领1个，但可以同时申领多种免费试用产品。

4.  申领次数：免费试用产品仅限于试用的目的，每个实验室对于相同的免费试用产品仅限申领一次。

5.  运费：如果单独申领免费试用产品，运费由申领人承担。如果在订购产品时申领，运费和所订购产品合并计算。

• 质量保证与免责声明：

1.   我们保证向用户提供完全合格的产品。如您认为产品确实存在质量问题，请在收到产品7个工作日内并且产品使用量没有超过一半前以书面方式发送电子邮件至jjy@jianjiyue.cn，否则将不予受理或赔偿。同时产品赔偿只限于产品价值本身，不涉及其他任何损失。如果您的样品非常珍贵，请务必先使用适当的阳性对照进行检测，在检测体系建立起来以后，再检测您珍贵的样品。

2.  若因用户贮存或使用不当所引起的质量投诉，我们不予承担责任。除质量原因外的其它任何问题，例如缺乏使用某种试剂盒所需的仪器，订购错了试剂盒等，我们不承担任何责任，也不接受非质量原因引起的客户投诉。

3.  如发现产品有任何缺漏或破损，请在收到产品后2个工作日内通知我们。

4.  我们提供的所有产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。如有单位或个人擅自改变我们产品的用途，或存放于不适当的地方，我们不承担任何责任。

HI-MMLV Reverse Transcriptase Kit

货号：ER001             规格：25T/50T/100T            保存：-20℃保存

产品简介：

本品提供了所有的用于cDNA第一链合成的试剂，其中逆转录酶的RNase H活性较低，在50℃下具有更高的热稳定性和更长的半衰期，可提供较其他逆转录酶更高的全长cDNA产量，能够利用起始RNA稳定地生成具有完整基因代表性的cDNA，优化后的体系显著提高反应的灵敏性，避免“假阴性”结果。本品可获得代表起始RNA的高保真度的cDNA，适用于灵敏度要求较高的实时荧光定量RT-PCR和芯片实验。本品中HI-MMLV Reverse Transcriptase的浓度为200U/μL。

产品内容：

储存条件：

-20℃保存一年，避免反复冻融，使用时注意标签上的有效时间。

活性单位：

以Poly (rA)·Oligo (dT)为模板/引物，在37℃、10min条件下，掺入1nmol的[3H]dTTP所需要酶量定义为1个活性单位（U）。

产品用途：

1. First-Strand cDNA的合成；

2. cDNA Probe的制备；

3. 一步法RT-PCR反应；

4. Real Time PCR反应和芯片实验。

产品特点：

酶活高效:高效的逆转录酶活性，后续实验兼容性好。

应用广泛:适用于所有RNA,尤其是具有复杂二级结构的RNA模板。

稳定性强:较高的热稳定性及灵敏度、更长的半衰期。

简便快捷:配置内容齐全，操作简便，可获得高品质cDNA。

实验示例：

使用ER001和国内某品牌的逆转录酶逆转录得到的核酸进行检测，检测结果如下:

对逆转录出来的核酸进行荧光定量检测结果如下图:

使用HI-MMLV Reverse Transcriptase Kit ( ER001)，对逆转录出来的
片段进行扩增，扩增效果比国内A公司同类产品CT小。左侧为ER001，

右侧为国内A厂家。

操作步骤（First-Strand cDNA合成的实验）:

1. 在无菌的RNase -free的离心管配制以下体系：

1）2μL Random Primer (10µM)或2pmol基因特异引物或2μL Oligo (dT)₁₆ Primer (10μM)。

2）10pg-5µg总RNA或50-500ng mRNA；0.4μL dNTP Mixture（dATP、dGTP、dCTP和dTTP各25mM）。

3）补RNase-Free ddH₂O到10μL。

2. 65℃保温5min后迅速在冰上冷击至少1min以上。

3. 离心数秒钟使模板RNA/引物的变性溶液聚集于离心管底部。

4. 在上述离心管中配制下列逆转录反应液。

5. 轻弹离心管，50℃保温30-60min，或随机引物的反应在37℃保温60min，其他引物的反应在37℃保温60min。

6. 80℃保温15min后冰上冷却，得到的cDNA溶液可直接用于2nd-Strand cDNA的合成或者PCR扩增等，PCR扩增时cDNA溶液的使用量建议使用10μL。

注意事项：

1. 将实验所需溶液室温平衡至完全溶解，其中5× HI-MMLV Buffer在使用前需振荡混匀，轻轻离心后使用，其他组分温和混匀，瞬时离心后于冰上进行反应体系配置。

2. 当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液（Master Mix；其中包括RNase Free dH₂O、Buffer、酶等），然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。

3. HI-MMLV Reverse Transcriptase (200U/μL)在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使枪头插入液面过深，否则会因枪头壁粘着造成损失，而使酶量不足。

4. 分装试剂时务必使用新的枪头，以防止样品间污染。扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR反应完成后切勿直接打开反应管，可放于4℃或者-20℃充分冷却后再进行开盖操作，以最大限度的减少PCR产物可能对实验环境产生污染的风险。

ER001 HI-MMLV Reverse Transcriptase Kit.docx