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Taq Hot-Start DNA Polymerase

280

货号:  EH001-01

单位:  袋

品牌:  三狮

规      格: 

500U

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  • 免费试用产品申领规范:

1.   申领对象:欢迎申领健吉跃的免费试用产品。健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,非专业人员不得申领。

2.   使用范围:健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3.  申领个数:免费试用产品仅限于试用的目的,对于任何一种免费试用产品,只能申领1个,但可以同时申领多种免费试用产品。

4.  申领次数:免费试用产品仅限于试用的目的,每个实验室对于相同的免费试用产品仅限申领一次。

5.  运费:如果单独申领免费试用产品,运费由申领人承担。如果在订购产品时申领,运费和所订购产品合并计算。

 

  • 质量保证与免责声明:

1.   我们保证向用户提供完全合格的产品。如您认为产品确实存在质量问题,请在收到产品7个工作日内并且产品使用量没有超过一半前以书面方式发送电子邮件至jjy@jianjiyue.cn,否则将不予受理或赔偿。同时产品赔偿只限于产品价值本身,不涉及其他任何损失。如果您的样品非常珍贵,请务必先使用适当的阳性对照进行检测,在检测体系建立起来以后,再检测您珍贵的样品。

2.  若因用户贮存或使用不当所引起的质量投诉,我们不予承担责任。除质量原因外的其它任何问题,例如缺乏使用某种试剂盒所需的仪器,订购错了试剂盒等,我们不承担任何责任,也不接受非质量原因引起的客户投诉。

3.  如发现产品有任何缺漏或破损,请在收到产品后2个工作日内通知我们。

4.  我们提供的所有产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。如有单位或个人擅自改变我们产品的用途,或存放于不适当的地方,我们不承担任何责任。

产品概述

Taq Hot-Start DNA Polymerase

货号:EH001           规格:500U/1000U/5000U          保存:-20℃保存

产品简介:

本产品是抗体封闭型热启动酶,可抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增,适用于Hot Start PCR。由于抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已失活,因此无需特殊灭活处理,在常规PCR反应条件下即可使用。使用本产品扩增得到的PCR产物3’端附有一个A碱基,因此可直接克隆于T-Vector中;也可以在末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端载体中。

产品组成:

image.png

储存条件:

-20℃条件下保存,有效期至少12个月。

活性定义:

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃30分钟内,摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

质量控制:

本产品经质量检测,不含脱氧核糖核酸内切酶活性、脱氧核糖核酸外切酶活性和核糖核酸酶污染。宿主基因组残留低于10拷贝。

产品用途:

Hot Start PCRDNA序列测定。


实验示例

         

                示例1  EH001样本线性测试结果

使用SANSHIBIO Taq Hot- Start DNA Polymerase ( EH001),对系列梯度稀释的样本进行扩增。实验结果表明,EH001具备良好的、稳定的扩增性能,7个样本梯度的扩增Ct值的线性系数> 0.99。

          

                    示例2  EH001样本重复性测试结果

使用SANSHIBIO Taq Hot- Start DNA Polymerase ( EH001),对同一浓度样本进行扩增。实验结果表明,EH001具备良好的、稳定的扩增性能,同一样本浓度的扩增Ct值的变异系数CV <3%。



使用方法:

1. 将实验所需试剂室温平衡至完全溶解,充分温和混匀(请勿涡旋振荡),瞬时离心后使用,避免产生大量气泡,避免反复多次冻融,若经常使用请保存在4℃。按下列组分配制PCR反应液(反应液配制请在冰盒上进行):

推荐反应体系:

image.png

注:反应体系中各组分用量可根据实际需求进行调整。

2. 通常情况下,可以采用两步法进行反应;如果两步法扩增不理想,可以采用三步法设置PCR反应程序。

image.png

注:反应条件可以根据实际需求进行适当调整和优化。

3. 反应结束后,对实验结果进行分析。详细分析方法参见PCR 扩增仪操作手册。

注意事项:

1.      请根据引物选择合适的退火(延伸)温度。通常引物的Tm值设计在60℃左右。对于退火温度较低的引物或超过200bp的长片段扩增,建议采用三步法。延伸时间可根据PCR产物的长度、GC含量等实际情况进行调整,每kb产物的延伸时间与模板复杂程度密切相关,简单模板为20s,一般模板为30s,复杂模板为1min

2.      PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件,通常使用的引物终浓度可在0.2-1.0μM范围内调整,DNA模板可根据浓度进行调整,模板复杂或GC含量建议延长预变性/变性或延伸时间,提高变性/退火温度等。

3.      扩增前后要使用专用的区域和移液器,戴手套操作并经常更换,PCR反应完成后切勿直接打开反应管,可放于4℃或者-20℃充分冷却后再进行开盖操作,以最大限度的减少PCR产物可能对实验环境产生污染的风险。