• 订购流程：

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账户：陕西健吉跃生物科技有限公司

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账号：61050110309100000096

• 免费试用产品申领规范：

1.   申领对象：欢迎申领健吉跃的免费试用产品。健吉跃所有产品，包括免费试用产品，仅限于专业人员的科学研究用，非专业人员不得申领。

2.   使用范围：健吉跃所有产品，包括免费试用产品，仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3.  申领个数：免费试用产品仅限于试用的目的，对于任何一种免费试用产品，只能申领1个，但可以同时申领多种免费试用产品。

4.  申领次数：免费试用产品仅限于试用的目的，每个实验室对于相同的免费试用产品仅限申领一次。

5.  运费：如果单独申领免费试用产品，运费由申领人承担。如果在订购产品时申领，运费和所订购产品合并计算。

• 质量保证与免责声明：

1.   我们保证向用户提供完全合格的产品。如您认为产品确实存在质量问题，请在收到产品7个工作日内并且产品使用量没有超过一半前以书面方式发送电子邮件至jjy@jianjiyue.cn，否则将不予受理或赔偿。同时产品赔偿只限于产品价值本身，不涉及其他任何损失。如果您的样品非常珍贵，请务必先使用适当的阳性对照进行检测，在检测体系建立起来以后，再检测您珍贵的样品。

2.  若因用户贮存或使用不当所引起的质量投诉，我们不予承担责任。除质量原因外的其它任何问题，例如缺乏使用某种试剂盒所需的仪器，订购错了试剂盒等，我们不承担任何责任，也不接受非质量原因引起的客户投诉。

3.  如发现产品有任何缺漏或破损，请在收到产品后2个工作日内通知我们。

4.  我们提供的所有产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。如有单位或个人擅自改变我们产品的用途，或存放于不适当的地方，我们不承担任何责任。

2× SYBR Green qPCR Mix

货号：EH003                 规格：1mL                保存：-20℃保存

产品简介：

本产品是采用SYBR Green I染料嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂，含有抗体封闭型热启动酶，能够有效抑制低温条件下引物非特异性退火或者引物二聚体引起的非特异性扩增，提高扩增反应的特异性。本产品具备扩增效率高、检测特异性及灵敏度强、稳定性好、操作使用简便等特点，可以在较宽定量区域内得到良好的标准曲线，准确进行定量，同时与Applied Biosystems、Eppendorf、Bio-Rad、Roche及国产品牌等的多家荧光定量PCR仪兼容。

产品组成：

注意：自备或与厂家联系购置ROX Reference Dye，用以校正部分公司Real Time PCR扩增仪的孔间荧光信号误差。ROX Reference Dye I适用于ABI PRISM 7000/7700/7300/7900HT及Step One Plus Real-Time PCR System等；ROX Reference Dye II适用于7500 Real-Time PCR System、7500 Fast Real -Time PCR System、Stratagene Mx3000P、Mx3005P及Mx4000等；ROX Reference Dye I、II反应终浓度均为1×。LightCycler、Thermal Cycler Dice Real Time System II、Smart Cycler System等实时荧光定量PCR扩增仪不需使用。

储存条件：

-20℃条件下保存，有效期至少12个月。

活性定义：

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制：

本产品经质量检测，不含脱氧核糖核酸内切酶活性、脱氧核糖核酸外切酶活性和核糖核酸酶污染。宿主基因组残留低于10拷贝。

产品用途：

实时荧光定量qPCR（染料法）扩增DNA或cDNA；绝对定量qPCR；相对定量qPCR。

产品特点

高特异性:采用高封闭效率的抗体封闭型热启动酶，无引物二聚体出现，具有高特异性和高重现性。

高稳定性:反应缓冲液中添加了独特的稳定剂，37℃孵育一周以上性能保持不变。方便进行运输、室温融化迅速。

应用广泛:反应缓冲液中添加了独特的增强剂，具有更低的解链温度，利于高GC含量序列扩增，线性范围更广。

实验示例

          示例1 EH003样本线性测试结果

      使用SANSHIBIO 2x SYBR Green qPCR Mix 

(EH003)，对系列梯度稀释的样本进行扩增。实验
结果表明，EH003具备良好的、稳定的扩增性能，7
个样本梯度的扩增Ct值的线性系数> 0.99。

      示例2 EH003样本重复性测试结果

使用SANSHIBIO 2x SYBR Green qPCR Mix 

(EH003)，对同- -浓度样本进行扩增。实验结果表
明，EH003具备良好的、稳定的扩增性能，同-样
本浓度的扩增Ct值的变异系数CV<3%。

      示例3 EH003扩增熔解曲线测试结果

使用SANSHIBIO 2x SYBR Green qPCR Mix 

(EH003)， 对同一浓度样本进行扩增及熔解曲线分
析。实验结果表明，EH003具备良好的、稳定的扩
增性能，熔解温度均一性较好，无引物二聚体等非

特异性扩增。

操作方法：

将实验所需试剂室温平衡至完全溶解，充分温和混匀（请勿涡旋振荡），瞬时离心后使用，避免产生大量气泡，避免反复多次冻融，若经常使用请保存在4℃。按下组分制制PCR反应液（反应液配制请在冰盒上进行）：

注：各组分用量可根据实际需求进行调整，ROX Reference Dye需要用户根据实际使用的机型选择是否添加。

2. 通常情况下，可以采用两步法进行反应；如果两步法扩增不理想，可以采用三步法设置PCR反应程序。

注：反应条件可以根据实际需求进行适当调整和优化，熔解曲线程序根据所使用的扩增仪程序进行适配选择。

3. 反应结束后，对扩增曲线及熔解曲线结果进行分析。详细分析方法参见Real Time PCR扩增仪操作手册。

注意事项：

1. 请根据引物选择合适的退火（延伸）温度，通常引物的Tm值设计在60℃左右；对于退火温度较低的引物，建议采用三步法；使用的引物终浓度可在0.2-1.0μM范围内调整；DNA模板可根据浓度进行适当调整。

2. SYBR Green I染料是非特异性染料，可与双链DNA（dsDNA）结合后发出荧光，同时其强光下易分解，因此在设计引物时需要尽量避免引物二聚体的产生，使用时避免长时间强光照射，以提高检测结果准确性、灵敏度及特异性。

3. 提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用，建议在使用本产品进行荧光PCR反应优化时，可适当增加镁离子浓度（比普通PCR反应高出0.5-3.0mM）。

4. 扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR反应完成后切勿打开反应管。以最大限度的减少PCR产物对检测环境的污染。

EH003-02 2×SYBR Green qPCR Mix.docx