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LightSpeed™ ApaLI

228

货号:  EZ22001S

单位:  袋

品牌:  三狮

规      格: 

200T

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账号:61050110309100000096

 

  • 免费试用产品申领规范:

1.   申领对象:欢迎申领健吉跃的免费试用产品。健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,非专业人员不得申领。

2.   使用范围:健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3.  申领个数:免费试用产品仅限于试用的目的,对于任何一种免费试用产品,只能申领1个,但可以同时申领多种免费试用产品。

4.  申领次数:免费试用产品仅限于试用的目的,每个实验室对于相同的免费试用产品仅限申领一次。

5.  运费:如果单独申领免费试用产品,运费由申领人承担。如果在订购产品时申领,运费和所订购产品合并计算。

 

  • 质量保证与免责声明:

1.   我们保证向用户提供完全合格的产品。如您认为产品确实存在质量问题,请在收到产品7个工作日内并且产品使用量没有超过一半前以书面方式发送电子邮件至jjy@jianjiyue.cn,否则将不予受理或赔偿。同时产品赔偿只限于产品价值本身,不涉及其他任何损失。如果您的样品非常珍贵,请务必先使用适当的阳性对照进行检测,在检测体系建立起来以后,再检测您珍贵的样品。

2.  若因用户贮存或使用不当所引起的质量投诉,我们不予承担责任。除质量原因外的其它任何问题,例如缺乏使用某种试剂盒所需的仪器,订购错了试剂盒等,我们不承担任何责任,也不接受非质量原因引起的客户投诉。

3.  如发现产品有任何缺漏或破损,请在收到产品后2个工作日内通知我们。

4.  我们提供的所有产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。如有单位或个人擅自改变我们产品的用途,或存放于不适当的地方,我们不承担任何责任。

产品概述

LightSpeedTM ApaLI

货号:EZ22001S               规格:200T               保存:-20℃保存

产品简介:

5'...GTGCAC...3'

3'...CACGTG...5'

注:同裂酶:Alw44IVneI同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性。

LightSpeedTM超快速内切酶是一系列经过基因工程重组、快速、精确完成DNA切割的限制性内切酶,适用于质粒DNAPCR产物或基因组DNA等的快速酶切。LightSpeedTM超快速内切酶具有如下特点:5~15分钟内即可完成酶切;共用一种酶切Buffer,大大简化酶切反应体系;良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外,去磷酸化、连接试剂在EZ酶切Buffer中具有100%活性,支持一管化反应,提升“酶切-修饰-连接”的体验。

产品组成:

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储存条件:

-20℃以下冷冻避光保存,有效期至少24个月。

质量控制:

功能活性检测:最适反应温度下,在20μL反应体系中,1μL LightSpeedTM ApaLI能够在15分钟内完全消化1μg λDNA (HindIII digest)

超长时间温育检测:最适反应温度下,将1μL LightSpeedTM ApaLI1μg λDNA (HindIII digest)共同温育3小时,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。

酶切-连接-再酶切检测:最适反应温度下,使用1μL LightSpeedTM ApaLI消化底物,回收酶切产物,在22℃下使用适量Fast T4 DNA Ligase可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

非特异性内切酶活性检测:最适反应温度下,将1μL LightSpeedTM ApaLI1μg超螺旋质粒DNA共同温育4小时,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒DNA仍然处于超螺旋状态。

 

使用方法: 

1. DNA快速酶切流程

在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:

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注:本体系适用于经过纯化的PCR产物酶切。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10× EZ Buffer加入量可适当减少至2μL。但由于DNA聚合酶同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对PCR产物进行纯化。

轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;

③37℃温育15分钟(质粒),或15~30分钟(PCR产物),或30~60分钟(基因组DNA);

④80℃温育20分钟即可使酶失活,停止反应(可选)。

2. 双酶切或多酶切

每种快速内切酶的用量为1μL,并根据需要适当扩大反应体系;

所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10

如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。

3. 适用于质粒的扩大反应体系

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注:如果总反应体系大于20μL,应适当增加温育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。

4. 不同DNA中的酶切位点数量

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5. 甲基化修饰影响

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6. 在不同反应缓冲液中的活性

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注:活性数据来自三狮生物限制酶标准反应体系下的检测。