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虾肝肠胞虫(EHP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

1920

货号:  WP2101003-02

单位:  盒

品牌:  三狮

规      格: 

48T

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1.   申领对象:欢迎申领健吉跃的免费试用产品。健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,非专业人员不得申领。

2.   使用范围:健吉跃所有产品,包括免费试用产品,仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

3.  申领个数:免费试用产品仅限于试用的目的,对于任何一种免费试用产品,只能申领1个,但可以同时申领多种免费试用产品。

4.  申领次数:免费试用产品仅限于试用的目的,每个实验室对于相同的免费试用产品仅限申领一次。

5.  运费:如果单独申领免费试用产品,运费由申领人承担。如果在订购产品时申领,运费和所订购产品合并计算。

 

  • 质量保证与免责声明:

1.   我们保证向用户提供完全合格的产品。如您认为产品确实存在质量问题,请在收到产品7个工作日内并且产品使用量没有超过一半前以书面方式发送电子邮件至jjy@jianjiyue.cn,否则将不予受理或赔偿。同时产品赔偿只限于产品价值本身,不涉及其他任何损失。如果您的样品非常珍贵,请务必先使用适当的阳性对照进行检测,在检测体系建立起来以后,再检测您珍贵的样品。

2.  若因用户贮存或使用不当所引起的质量投诉,我们不予承担责任。除质量原因外的其它任何问题,例如缺乏使用某种试剂盒所需的仪器,订购错了试剂盒等,我们不承担任何责任,也不接受非质量原因引起的客户投诉。

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4.  我们提供的所有产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。如有单位或个人擅自改变我们产品的用途,或存放于不适当的地方,我们不承担任何责任。

产品概述

虾肝肠胞虫(EHP

核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

货号:WP2101003              规格:48T                保存:-20℃保存

产品简介:

本试剂盒采用探针法实时荧光定量PCR技术,针对虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaeiEHP)核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光定量PCRTaqman探针法)扩增曲线对动物组织、饲料等样品中的EHP核酸进行定性及定量检测。

产品内容:

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储存条件:

-20℃以下冷冻避光保存,有效期至少12个月。

适用仪器:

ABI系列(ABI 7300/ABI 7500/Step One等),罗氏LightCycler系列,伯乐CFX 96,三狮生物Q162D等实时荧光定量PCR仪。

样本处理:

参照相关标准对样本进行处理,处理后的样本保存待用。

实验操作:

1. 样本制备(样本制备区)

请参照总DNA/RNA提取试剂盒说明书,或使用ES08全自动核酸提取纯化仪配套快速核酸提取试剂盒(磁珠法),或其他符合相关标准的核酸提取试剂盒/方法,对处理后的样本进行核酸提取。提取的样本核酸尽量及时进行检测,放置于冰盒中,否则于-20℃保存。

2. 配制反应体系(加样区)

2.1 取出EHP阳性对照管、阴性对照管和实验所需含EHP反应液的反应管(n+2)个(即n个待检样本+阳性对照+阴性对照),室温条件下使试剂完全解冻,离心10秒,将管壁和管盖内的液体离心至管底,放在冰盒中备用。

2.2 然后向反应液八连排管中依次添加2μL提取的阴性对照、样本核酸和EHP阳性对照,盖好管盖,作好记录,每个反应总体积为25μL。充分混匀,离心30秒后在实时荧光定量PCR仪上进行扩增实验。

3. 荧光PCR扩增(扩增及产物分析区)

95℃预变性3分钟;95℃变性5秒,60℃退火延伸30秒,40个循环,在60℃时收集荧光信号。荧光基团选择FAM,淬灭基团选择None(使用ABI系列实时荧光定量PCR仪,若有需求可提前联系厂家或自行添加ROX校正染料,淬灭基团选择ROX;否则参照正常程序进行)。

4. 结果判定

4.1 阳性对照的Ct值<30且出现“S”型扩增曲线,阴性对照无Ct值或Ct值≥40且无“S”型扩增曲线,实验结果有效;否则应重新进行实验,如重测实验仍无效,请与技术人员联系。

4.2 样本检测结果Ct值≤38且出现“S”型扩增曲线,判定为阳性,表明样本中含有虾肝肠胞虫(EHP)。

4.3 样本检测结果38Ct40,判定为可疑。应对样本进行复测,如复测Ct值<40,且有明显的扩增曲线,则判定为阳性,否则判定为阴性。

4.4 样本检测结果无Ct值或Ct值≥40且无“S”型扩增曲线,判定为阴性,表明样本中未检测出虾肝肠胞虫(EHP)。

注意事项:

1)本试剂盒检测灵敏度高。为了防止污染,实验需要严格进行分区操作,分区之间最好进行物理性隔离,避免人为因素造成交叉污染。

2)实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。

3)反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融。

4)试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求进行操作。操作台、离心机及移液器等仪器应定期使用含氯消毒剂、消毒酒精、核酸污染清除剂或紫外灯进行消毒。

5)反应结束后,PCR反应管请置于密封袋内处理,禁止开盖,避免气溶胶污染。

6)不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。耗材应进行无酶无菌处理。

7)检测结果为阴性,并不完全代表为非感染状态,与获取的核酸质量密切相关,核酸样本质量不合格、样本核酸载量过低或核酸提取(检测)不成功亦会产生“阴性”结果,具体诊断需结合兽医临床。

8)产生假阳性的可能原因:待检样本采集、运输及核酸提取过程中发生交叉污染。

9如有其他疑问请及时与厂家技术人员联系。本品仅供科学研究使用,不用于临床诊断等其他用途。